Kuantifikasi Tuvusertib (M1774) dalam Plasma Manusia dengan LC-MS/MS

ABSTRAK
Ataxia-telangiectasia dan protein kinase terkait Rad3 (ATR) merupakan pengatur penting respons kerusakan DNA (DDR) pada cabang replikasi yang terhenti dan kolaps. Tuvusertib (M1774) merupakan penghambat ATR molekul kecil yang selektif dan tersedia secara oral yang saat ini dalam tahap pengembangan praklinis dan klinis untuk pengobatan kanker. Studi ini menyajikan uji 5 menit yang kuat dan sederhana yang dirancang untuk kuantifikasi agen tunggal tuvusertib dalam plasma manusia menggunakan spektrometri massa tandem kromatografi cair (LC-MS/MS). Volume plasma 20 μL mengalami presipitasi protein, diikuti oleh pemisahan kromatografi menggunakan Phenomenex Synergi Polar-RP (4 μm, 2,1 × 50 mm) dan sistem fase gerak gradien yang terdiri dari 0,1% asam format dalam air dan asetonitril selama waktu pengoperasian 4 menit. Deteksi spektrometri massa dicapai menggunakan spektrometer massa tandem SCIEX 6500+ dengan ionisasi mode positif elektrospray. Dengan standar internal isotop yang stabil, pengujian kami memenuhi kriteria yang digariskan oleh pedoman Badan Pengawas Obat dan Makanan untuk validasi metode bioanalitik, yang menunjukkan kinerja yang kuat dalam kisaran 5 hingga 5000 ng/mL. Pengujian ini akan mendukung studi klinis yang sedang berlangsung dan di masa mendatang dengan mendefinisikan farmakokinetik tuvusertib.