Penentuan Atezolizumab dan Bevacizumab secara Simultan dengan LC–MS/MS dalam Plasma Tikus dan Aplikasinya pada Studi Farmakokinetik

ABSTRAK
Metode LC–MS/MS yang kuat, cepat, dan sangat sensitif dikembangkan dan divalidasi untuk kuantifikasi simultan atezolizumab dan bevacizumab dalam plasma tikus, dengan aplikasi potensial dalam studi farmakokinetik. Fase mobil terdiri dari air dengan 0,1% asam format (fase mobil A) dan asetonitril dengan 0,1% asam format (fase mobil B) dalam rasio isokratik 30:70, memberikan pemisahan optimal pada kolom Agilent Eclipse XDB (250 mm × 4,6 mm, 5 μm). Peptida terpilih untuk atezolizumab (IYPTNGYTR) dan bevacizumab (LTVLHQDWLNGK) menghasilkan ion induk pada m/z 579,78 dan 686,38, dan ion anak pada 746,36 dan 859,44, masing-masing. Standar internal, abciximab, menggunakan peptida VQWLQAGK dengan ion induk dan anak pada m/z 471,26 dan 590,32, masing-masing. Atezolizumab dan bevacizumab divalidasi pada rentang linier 3,00–120 ng/mL dan 1,25–50,00 ng/mL, yang menunjukkan koefisien korelasi yang sangat baik ( r2 = 0,999). Akurasi metode untuk atezolizumab berkisar antara 96,76% hingga 99,55%, dengan presisi (%CV) antara 0,09% dan 2,45% di seluruh kendali mutu  , sementara bevacizumab menunjukkan akurasi dari 97,05% hingga 99,82% dengan presisi (%CV) berkisar antara 0,09% hingga 8,82%. Efek matriks pada kadar QC rendah dan tinggi mengonfirmasi konsistensi, dengan akurasi dan presisi untuk atezolizumab dan bevacizumab yang melampaui pedoman ICH. Metode yang dioptimalkan ini menawarkan alat yang berharga untuk profil farmakokinetik atezolizumab dan bevacizumab dalam plasma tikus, yang memberikan wawasan untuk pemantauan terapeutik dan pengembangan obat.